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小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒

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上海恒远生物供应进口“小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒",我司专业代理国外R&D品牌试剂盒,各种标本、种属、具体指标齐全,品种多,质量好,灵敏度高,试剂盒价格洽谈,。
  小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒的详细资料:

 小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒含税含运费 , 
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    产品规格:96T/48T 
    96T指可以做94个标本,2个标准对照 
    48T指可以做47个标本,1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    操作步骤 
    1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 
    3600 pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 
    1800pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 
    900pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 
    450 pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 
    225pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 
     
     
    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 
    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
    4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 
    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 
    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
    7.温育:操作同3。 
    8.洗涤:操作同5。 
    9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 
    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 
    Assay procedure 
    1.Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table: 
    800 nmol/L5 Standard150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 
    400 nmol/L4 Standard150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 
    200 nmol/L3 Standard150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 
    100 nmol/L2 Standard150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 
    50 nmol/L1 Standard150μl 2 Standard +150μl Standard diluent 
    2.add sample:Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix. 
    3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃. 
    4.Configurate liquid: 30-fold wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve. 
    5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat. 
    6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well. 
    7.incubate:Operation with 3. 
    8.washing:Operation with 5. 
    9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃ 
    10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color). 
    11.assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min. 
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